1、 葡萄糖：用于細胞能量代謝。
2、CO?：細胞需要少量的二氧化碳來維持生長。
在培養基中，溶解的CO?與碳酸氫鹽離子處于平衡狀態，許多培養基利用了這種CO?/碳酸氫鹽反應來緩沖培養基的pH值。CO?溶解在培養基中，與水反應生成碳酸。隨著細胞代謝產生更多的CO?，隨著下面的化學反應向右驅動，介質的pH值下降，通過向培養基中添加碳酸氫鈉，可使pH值維持在7.2 ~ 7.4的最佳范圍。
3、酚紅：用于監測培養基的pH值。
在細胞生長過程中，由于細胞釋放的代謝物改變了pH值，培養基的顏色也隨之改變。在較低的pH值下，酚紅會變成中黃色，而在較高的pH值下，它會變成中紫色。對于大多數培養體系(pH為7.2 ~ 7.4)，培養基應為鮮紅色。（部分特殊培養基不添加酚紅，例如對雌激素敏感的乳腺組織細胞，酚紅會發揮跟類固醇相似的功能從而影響細胞。）
4、L-谷氨酰胺：
幾乎是所有哺乳動物和昆蟲細胞所必需的氨基酸，用于合成蛋白質，參與核酸代謝。它相比其他氨基酸更不穩定，容易降解，降解的速率和程度與儲存溫度、時間和pH值有關。
5、非必需氨基酸NEAA：
所有的培養基配方都含有10種必需氨基酸以及半胱氨酸、谷氨酰胺和酪氨酸。在一些培養基中還需要加入其他非必需氨基酸(丙氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、甘氨酸、谷氨酸、脯氨酸和絲氨酸)可以減少細胞的代謝負擔，從而增加細胞增殖。
6、 丙酮酸鈉：
丙酮酸是糖酵解過程中的中間有機酸代謝物，可以輕易地進出細胞，可以為合成代謝過程提供能量來源和碳骨架。大多數培養基中丙酮酸鈉的最終濃度為1mM，但在L-15培養基中增加到5mM，方便在無CO2環境中使用。
